生物化学技术实验指导 / 孙培龙，吴石金主编.——北京:化学工业出版社,2008. – (58.173057/1944)

Contents

    目 录<br>    
    第一部分 生物化学技术原理<br>    一、实验记录与实验报告的书写1
    二、实验室基本操作2
     (一) 玻璃仪器的洗涤与清洁2
     (二) 塑料器皿的清洗3
     (三) 清洗液的原理与配制3
     (四) 量器类的使用法4
     (五) 过滤方法7
     (六) 试管及离心管中液体的混匀操作7
    三、几种常规仪器的使用8
     (一) 分光光度计8
     (二) 电子天平11
     (三) 干燥箱和恒温箱13
     (四) 电热恒温水浴14
     (五) 离心机15
    四、生物大分子的制备及鉴定16
     (一) 盐析技术17
     (二) 透析和超滤20
     (三) 减压浓缩和冷冻干燥20
    五、层析技术21
     (一) 吸附层析21
     (二) 分配层析22
     (三) 离子交换层析23
     (四) 凝胶过滤层析26
     (五) 亲和层析28
    六、电泳技术29
     (一) 基本原理29
     (二) 影响泳动率的因素29
     (三) 电泳技术的种类31
    第二部分 生物化学实验
    第一节 基本实验35
     实验一 苯酚一硫酸法测定水溶性多糖35
     实验二 氨基酸纸上层析37
     实验三 糖的硅胶G薄层层析39
     实验四 磷脂的分离与鉴定——薄层层析法41
     实验五 甲醛滴定法定量测定氨基酸44
     实验六 蛋白质的两性反应和等电点的测定45
     实验七 蛋白质浓度的测定49
     实验八 微量凯氏定氮法测总蛋白氮55
     实验九 核酸的定量测定59
     实验十 维生素C的定量测定——2，6-二氯酚靛酚滴定法63
    第二节 综合性实验66
     实验一 蔗糖酶的提取及初提纯66
     实验二 蔗糖酶的纯化——Q Sepharose-柱层析法68
     实验三 蔗糖酶活力的测定 71
     实验四 蔗糖酶蛋白质含量测定及比活力计算73
     实验五 SDS-PAGE测定蛋白质的相对分子质量76
     实验六 蔗糖酶的固定化及活力测定81
    第三节 选择性实验84
     实验一 底物浓度对酶促反应速度的影响——米氏常数的测定84
     实验二 酶的特异性、温度、pH及激活剂对酶活性的影响86
     实验三 大豆总异黄酮的提取及含量测定90
     实验四 类胡萝卜素的色层分析及鉴定92
     实验五 组织DNA的提取及定量测定94
     实验六 DNA琼脂糖凝胶电泳98
     实验七 纸电泳法定量分析腺苷三磷酸101
     实验八 葡聚糖凝胶层析法测定蛋白质的分子量103
     实验九 酶联免疫吸附实验(ELISA)测定乳汁中孕酮含量107
     实验十 血清蛋白质的层析分离——血清r球蛋白的分离纯化(分子筛层析法)110
     实验十一 血清蛋白质的电泳分离——醋酸纤维素薄膜电泳112
     实验十二 脲酶的凝胶过滤分离纯化114
     实验十三 血清蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳118
     实验十四 肝糖原的提取和定量120
     实验十五 蛋白质印迹分析122
     实验十六 单向定量免疫电泳126
    附录
    一、生物化学实验室规则129
    二、实验室安全及防护知识129
    三、常用数据表131
    参考文献137