高级生物化学实验技术 / 高英杰，郝林琳主编.——北京:科学出版社,2011. – (58.173057/0044)

Contents

    目 录<br>    
    前言
    常用生物化学实验词汇及缩写<br>    第一部分 生物化学样品制备技术l
    第二部分 沉淀技术8
    第三部分 膜分离技术13
    第四部分 色谱技术22
     实验一 分子筛层析28
     血清蛋白质盐析及分子筛层析脱盐32
     实验二 离子交换层析34
     离子交换层析纯化血清蛋白36
     实验三 亲和层析39
     亲和色谱分离GST融合蛋白41
    第五部分 分光光度技术44
     实验四 蛋白质的定量检测49
     蛋白质的直接定量(UV)检测49
     比色法蛋白质定量50
     实验五 氨基酸的定量测定54
     实验六 色氨酸的定量测定56
     实验七 超氧化物歧化酶活力测定(邻苯三酚自氧化法) 59
     实验八 核酸含量的测定61
     紫外吸收法测定核酸含量61
     DNA含量测定——改良二苯胺法62
     RNA的测定——苔黑酚法63
     实验九 血液葡萄糖的测定65
     邻甲苯胺法65
     葡萄糖氧化酶法67
     实验十 血清钙的测定70
     邻甲酚酞络合酮法70
     甲基麝香草酚蓝比色法71
     实验十一 血清无机磷的测定73
     硫酸亚铁磷钼蓝比色法73
     紫外光光度法74
     米吐尔直接显色法75
     实验十二 血清甘油三酯(TG)的测定77
     实验十三 血清胆固醇的测定78
     实验十四 血液尿酸的测定80
     实验十五 抗坏血酸(维生素C)的测定82
     实验十六 维生素A的测定84
    第六部分 离心技术86
     实验十七 动物肝脏DNA的提取和鉴定90
     实验十八 质粒DNA的制备93
     实验十九 兔肝RNA的制备及其含量测定96
     实验二十 差速离心法分离大鼠肝脏细胞核和线粒体101
     实验二十一 家兔血清、血浆和无蛋白血滤液的制备103
     血清的分离与制备103
     血浆的分离与制备104
     无蛋白血滤液的制备104
    第七部分 电泳技术107
     实验二十二 不连续聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳分离血清蛋白质114
     实验二十三 SDS-不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳测定蛋白质分子质量121
     实验二十四 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定蛋白质的等电点126
     实验二十五 聚丙烯酰胺凝胶浓度梯度电泳测定蛋白质的分子质量136
     实验二十六 琼脂糖凝胶电泳分离血清乳酸脱氢酶同工酶140
     实验二十七 醋酸纤维薄膜电泳分离血清蛋白质144
     实验二十八 琼脂糖凝胶电泳分离DNA
     实验二十九 蛋白质双向电泳150
    第八部分 印迹技术158
     实验三十 蛋白质印迹164
     实验三十一 核酸印迹171
    第九部分 酶联免疫吸附测定技术177
     实验三十二 酶联免疫法测定兔血清IgG
    第十部分 放射免疫测定技术188
     实验三十三 放免法测定血清cAMP
    第十一部分 蛋白质结构分析技术203
     实验三十四 DNS-C1法测定蛋白质的N端氨基酸204
     实验三十五 蛋白质C端氨基酸的测定及顺序分析(羧肽酶法) 208
     实验三十六 蛋白质及多肽顺序分析(DABITC／PITC双偶合法)211
    附录215
     一、常用缓冲溶液的配制215
     二、易变质及需要特殊方法保存的试剂226
     三、离心机和转数的换算227
     四、硫酸铵饱和度常用表228
     五、某些物质燃烧时应用的灭火剂229
     六、几种常用实验动物的采血量和采血方法230
     七、干燥器内常用的干燥剂230
     八、测定蛋白质浓度的方法231
     九、SDS-PAGE中通常选用的标准蛋白质的分子质量231
    主要参考文献232